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    禽U6启动子的克隆、序列分析及其驱动的siRNA表达  CNKI文献

    【目的】分离用于禽源细胞中表达短干扰RNA(short interference RNA,siRNA)的禽U6启动子。【方法】以鸡基因组为模板进行PCR扩增,将扩增产物进行序列测定和生物信息学分析,并将其插入报告基因载体pEGFP-N1中,获得siRN...

    王永娟 沈鹏鹏... 《中国农业科学》 2009年08期 期刊

    关键词: 禽U6启动子 / 克隆 / 序列分析 / 转录活性

    下载(453)| 被引(9)

    京海黄鸡禽流感抗病性状的全基因组关联分析  CNKI文献

    试验旨在寻找影响京海黄鸡禽流感抗病性状的分子标记。本研究以京海黄鸡核心群母鸡为基础,测定了血清中的禽流感(H5亚型)抗体滴度,利用简化基因组测序技术进行全基因组关联分析(genome-wide association studies,GWAS...

    王文浩 李国辉... 《中国畜牧兽医》 2015年03期 期刊

    关键词: 京海黄鸡 / 简化基因组测序 / 禽流感抗病性状

    下载(136)| 被引(3)

    绵羊AA-NAT基因mRNA表达与常年发情相关性研究  CNKI文献

    为了探讨AA-NAT基因表达与绵羊常年发情之间的关联性,本研究以常年发情小尾寒羊和季节性发情滩羊各9只为研究对象,利用real-time PCR技术检测AA-NAT基因在这2种绵羊不同发情阶段下丘脑、垂体、松果体、卵巢、子宫体和...

    卢璐璐 孙晓笛... 《畜牧兽医学报》 2015年04期 期刊

    关键词: 绵羊 / 常年发情 / AA-NAT基因 / real-time

    下载(125)| 被引(2)

    京海黄鸡腹脂重性状的全基因组关联分析  CNKI文献

    试验旨在揭示京海黄鸡腹脂重性状的遗传基础,寻找可用于京海黄鸡腹脂重性状改良的分子标记。本研究以京海黄鸡核心群母鸡为研究对象,测定屠宰时的腹脂重,利用简化基因组测序技术进行全基因组关联研究(GWAS),检测与腹脂...

    段炼 王文浩... 《中国畜牧兽医》 2016年05期 期刊

    关键词: 简化基因组测序 / 京海黄鸡 / 腹脂重 / 全基因组关联分析

    下载(163)| 被引(0)

    表达绿色荧光蛋白报告基因重组禽腺联病毒载体系统的构建与...  CNKI文献

    为了开展重组禽腺联病毒(Recombinant avian adeno-associated virus,rAAAV)介导的基因转移研究,用限制性内切酶消化含AAAV全基因组的重组质粒pCR-AAAV,去除AAAV Rep和Cap蛋白编码序列,将PCR扩增的绿色荧光蛋白(Green...

    王安平 孙怀昌... 《病毒学报》 2007年04期 期刊

    关键词: 重组禽腺联病毒 / 构建 / 鉴定

    下载(268)| 被引(10)

    细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4增强传染性法氏囊病病毒VP2质粒...  CNKI文献

    为评价分子佐剂细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)对IBDV VP2质粒DNA的免疫增强作用,试验采用重组质粒载体表达重组蛋白mLTA-VP2-CTLA-4和mLTA-CTLA-4,家兔毒性试验确定其安全性,后选择10日龄非免疫健康鸡进行随机分...

    王永娟 朱善元... 《畜牧兽医学报》 2015年05期 期刊

    关键词: 传染性法氏囊病 / 分子佐剂 / 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 / VP2

    下载(96)| 被引(2)

    济宁青山羊性早熟候选基因研究  CNKI文献

    缩短母羊的初情期,有助于降低后备母羊的生产投入成本。济宁青山羊是一个性早熟、高繁殖力山羊品种。本研究旨在寻找新的与山羊性早熟有关的基因,了解其作用机制,期望能够用于缩短山羊初情期的分子育种。 1.根据牛...

    王永娟 导师:王金玉 扬州大学 2012-06-01 硕士论文

    关键词: 济宁青山羊 / 性早熟 / UBA52 / GDH1

    下载(138)| 被引(0)

    抗Ⅰ型鸭肝炎病毒RdRp蛋白噬菌体单链抗体库构建及单链抗体...  CNKI文献

    为构建抗1型鸭肝炎病毒(DHV-1)RdRp蛋白的单链抗体(scFv)库,并淘选特异性scFv,本研究采用RT-PCR方法从DHV-1基因组中扩增Rd Rp基因,将其克隆于pET-32a载体中进行重组RdRp蛋白原核表达。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,以提...

    王永娟 李碧春... 《中国预防兽医学报》 2015年05期 期刊

    关键词: Ⅰ型鸭肝炎病毒 / RdRp / 噬菌体抗体库 / 单链抗体

    下载(105)| 被引(1)

    山羊UBA52基因组织表达规律及其与性早熟的关联分析  CNKI文献

    为了探索UBA52基因表达规律与山羊性早熟的关系,本研究以性早熟品种济宁青山羊与性晚熟品种辽宁绒山羊为研究对象,分别应用RT-PCR与荧光定量PCR技术检测UBA52基因在这2种山羊不同发育阶段的组织表达情况和下丘脑、垂体...

    王耀武 王永娟... 《畜牧兽医学报》 2013年09期 期刊

    关键词: 山羊 / 性早熟 / UBA52基因 / 荧光定量

    下载(132)| 被引(0)

    山羊UBA52基因多态性及其与繁殖性能的关系  CNKI文献

    根据牛UBA52基因序列,设计3对引物(U1~U3),分别扩增随机选取的济宁青山羊和辽宁绒山羊样本,PCR产物克隆测序,序列比对结果显示仅在U3的扩增产物中发现G63A和T181C突变。设计引物U4,利用PCR-RFLP技术分别在性早熟、高...

    王永娟 储明星... 《安徽农业大学学报》 2012年01期 期刊

    关键词: 山羊 / UBA52基因 / 性早熟 / 产羔数

    下载(158)| 被引(2)

    鸡输卵管特异表达载体的优化及体内表达  CNKI文献

    为了实现鸡输卵管特异表达载体在相应组织特异高产表达,并简化质粒DNA的制备过程,本研究在已经构建的鸡输卵管特异表达载体pOV1基础上进行了优化改造,为进一步进行重组药物蛋白的暂态表达及转基因鸡研究奠定基础。首先...

    高波 孙怀昌... 《生物工程学报》 2008年01期 期刊

    关键词: 鸡输卵管特异表达载体 / LacZ基因 / 体内表达

    下载(158)| 被引(6)

    小尾寒羊AA-NAT基因克隆及其与繁殖性能的关系  CNKI文献

    根据牛AA-NAT基因DNA序列和绵羊该基因mRNA序列,设计5对引物(P1~P5),每对引物分别扩增随机选取的8只小尾寒羊,PCR产物克隆测序,序列拼接获得小尾寒羊AA-NAT的DNA序列,总长为2 138 bp。序列比对发现P3的扩增产物中存在...

    孙晓笛 储明星... 《安徽农业大学学报》 2012年05期 期刊

    关键词: 小尾寒羊 / AA-NAT基因 / 常年发情 / 产羔数

    下载(140)| 被引(1)

    人H1启动子转录shRNA的细胞种属特异性研究  CNKI文献

    利用siDirect软件预测绿色荧光蛋白(GFP)基因特异性小干扰RNA(siRNA),将人工合成的相应shRNA插入含人H1启动子的pSuper载体,获得表达载体pSuper-shRNA,再将H1-shRNA插入表达GFP基因的peGFP-N1载体,获得表达载体peGFP-...

    王永娟 王安平... 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 2007年03期 期刊

    关键词: H1启动子 / 绿色荧光蛋白 / shRNA表达 / 细胞种属特异性

    下载(181)| 被引(5)

    我国蒙古羊系统主要地方绵羊品种遗传分化的研究  CNKI文献

    应用中心产区典型群简单随机抽样的方法,检测控制湖羊、同羊、滩羊、小尾寒羊和洼地羊的血液酶和其他蛋白质变异的5个结构基因座位(Tf、X-p、Ary-Es、Hb-β、Ke)上的遗传变异,引用国内外学者以相同实验方法获得的其他...

    孙伟 王永娟... 《中国畜牧杂志》 2009年01期 期刊

    关键词: 亲缘系统 / 遗传分化 / 湖羊 / 同羊

    下载(191)| 被引(3)

    重组质粒载体和禽腺联病毒介导的miRNA抑制IBDV复制研究  CNKI文献

    传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种鸡的高度接触性传染病,除引起鸡死亡和生产性能下降,还可导致感染鸡的免疫抑制和其它疫苗接...

    王永娟 导师:孙怀昌 扬州大学 2008-05-01 博士论文

    关键词: 传染性法氏囊病病毒 / VP2基因 / 禽U6启动子 / 质粒载体

    下载(432)| 被引(0)

    牛气管抗菌肽cDNA的克隆与表达  CNKI文献

    目的:开发一种有效抑制动物细菌感染的重组抗菌肽。方法:根据已发表的牛气管抗菌肽(bTAP) mRNA序列设计引物,用RT-PCR从奶牛气管上皮细胞总RNA中扩增出214bp的bTAP cDNA,将其克隆入pUCm-T载体进行序列测定,将此cDNA分...

    王永娟 王安平... 《中国新药杂志》 2006年19期 期刊

    关键词: 牛气管抗菌肽 / cDNA / 克隆 / 表达

    下载(101)| 被引(3)

    鸡输卵管表达的重组人溶菌酶的鉴定  CNKI文献

    用直接结晶法从重组载体注射鸡蛋清中提取重组人溶菌酶(rhLYZ),并对其理化及生物学特性进行了鉴定。结果显示,rhLYZ能被hLYZ特异抗体识别;纯化的rhLYZ和天然hLYZ的热稳定性无显著差异,二者在pH 3.0~11.0范围内均具有活...

    朱秋菊 孙怀昌... 《中国兽医科学》 2006年03期 期刊

    关键词: 重组人溶菌酶 / 特性 / 鉴定

    下载(97)| 被引(2)

    中亚以东南地区绵羊运铁蛋白遗传多样性分析  CNKI文献

    为研究中亚以东南地区绵羊运铁蛋白(Tf)的遗传多样性,利用水平板聚丙烯酰胺(PAGE)梯度电泳技术,以湖羊、滩羊、洼地绵羊、同羊、小尾寒羊以及国内外得到的其他10种绵羊群体为对象,对其运铁蛋白遗传变异、基因分化系数...

    沈曼曼 孙伟... 《江苏农业科学》 2008年05期 期刊

    关键词: 绵羊 / 运铁蛋白(Tf) / 遗传多样性 / 遗传变异

    下载(43)| 被引(3)

    鸡输卵管表达的重组人溶菌酶的鉴定  CNKI文献

    为了对鸡输卵管特异表达载体表达的重组人溶菌酶(rhLYZ)的理化及生物学特性进行鉴定,用直接结晶法从重组载体注射鸡蛋清中提取溶菌酶,以兔抗hLYZ血清为一抗,HRP-标记的羊抗兔IgG为二抗,进行Western blotting检测,结果...

    朱秋菊 孙怀昌... 《中国兽医学报》 2007年02期 期刊

    关键词: 鸡蛋清 / 重组人溶菌酶 / 鉴定

    下载(118)| 被引(0)

    重组质粒表达的IBDV vp2基因特异miRNA对IBDV复制的抑制作用  CNKI文献

    用Genscript软件分析IBDV结构蛋白vp2基因序列,预测得5个潜在的miRNA,将其插入表达载体pRFPRNAiC。将重组载体与报告载体pVP2-GFP共转染DF-1细胞,经Northern dot blotting检测确认miRNA获得表达。对转染细胞进行荧光共...

    王永娟 孙怀昌... 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医... 2008-07-01 中国会议

    关键词: IBDV / vp2 / RNA干扰

    下载(39)| 被引(0)

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