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基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化  CNKI文献

运用定向进化-易错PCR方法,提高黄曲霉毒素解毒酶的活力及稳定性,并结合辣根过氧化物酶(HRP)-隐性亮绿(RBG)快速高通量筛选系统,构建了库容约为104的突变体库。经过两轮易错PCR,最终分别获得了耐高温70℃突变酶A1773、...

张赛 邢克克... 《生物工程学报》 2011年07期 期刊

关键词: 黄曲霉毒素解毒酶 / 稳定性 / 定向进化 / 易错PCR

下载(808)| 被引(21)

四环素核酸适配体电化学生物传感器的研制  CNKI文献

农产品抗生素残留是目前动物性食品安全中的突出问题。四环素的简便、快速检测方法是食品安全控制中十分重要的技术。本研究利用等温滴定量热法筛选到的四环素核酸适配体做识别分子制作生物传感器,用电化学方法研究了...

陈丹 姚冬生... 《中国生物工程杂志》 2013年11期 期刊

关键词: 四环素 / 核酸适配体 / 电化学

下载(520)| 被引(9)

分解玉米赤霉烯酮菌株的分离、鉴定及其产酶特征  CNKI文献

【目的】从发酵食品材料中筛选出对玉米赤霉烯酮(ZEN)有分解作用的微生物,研究其分解效率及产酶特征并进行菌种鉴定。【方法】利用添加ZEN毒素类似物(PL)的固体培养基对25种发酵食品材料进行初筛,获得毒素类似物耐受菌...

孙志轩 冼钰茵... 《微生物学通报》 2014年05期 期刊

关键词: 玉米赤霉烯酮 / 生物降解 / 产酶特征 / 枯草芽孢杆菌

下载(319)| 被引(4)

莱克多巴胺核酸适配体电化学生物传感器的研制  CNKI文献

莱克多巴胺(RAC)被大量非法用于畜牧生产,易在动物组织残留,对人体造成危害。因此,研发灵敏、快捷的检测RAC的新方法是有效控制RAC滥用的关键环节之一。通过等温滴定量热法筛选到了一条对莱克多巴胺有高亲和力(Kd=1.6...

周妮 陈丹... 《中国生物工程杂志》 2014年01期 期刊

关键词: 莱克多巴胺 / 核酸适配体 / 电化学

下载(379)| 被引(6)

假蜜环菌黄曲霉毒素氧化酶的基因克隆、表达、纯化及酶学性...  CNKI文献

【目的】黄曲霉毒素氧化酶(aflatoxin-oxidase,AFO)来源于假蜜环菌(Armillariella tabescens)的细胞内提取物,具有转化黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)的特性。为更进一步了解该酶的性质,我们克隆了AFO的基因,并进行...

温思霞 管敏... 《微生物学报》 2011年09期 期刊

关键词: 假蜜环菌 / 黄曲霉毒素氧化酶 / cDNA末端快速扩增 / 毕赤酵母

下载(371)| 被引(11)

基于易错PCR的假密环菌Armillariella tabescens MAN47 β-...  CNKI文献

本研究利用易错PCR技术突变假密环菌Armillariella tabescens MAN47 β-甘露聚糖酶野生型基因,PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体pYCα上连接,在大肠杆菌DH5α中扩增后电转入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae,...

吕晓慧 胡亚冬... 《生物工程学报》 2009年12期 期刊

关键词: 定向进化 / β-甘露聚糖酶 / 易错PCR / 热稳定性

下载(481)| 被引(14)

黄曲霉毒素解毒酶在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化及其圆二...  CNKI文献

目的:应用原核表达系统对黄曲霉毒素解毒酶(aflatoxin-detoxifizyme,ADTZ)进行高效可溶表达和纯化,并对其进行生物学活性与二级结构分析。方法与结果:亚克隆ADTZ的成熟肽,并构建与pMAL-c2x的重组质粒,转化大肠杆菌Ros...

胡熔 刘大岭... 《中国生物工程杂志》 2011年04期 期刊

关键词: 黄曲霉毒素解毒酶 / MBP_ADTZ融合蛋白 / 可溶性表达 / 圆二色谱

下载(565)| 被引(10)

饲用酶蛋白的理性设计及其改良技术  CNKI文献

酶作为天然的生物催化剂,具有高催化效率和高底物选择特异性的特点,在工农业生产上有重要的应用价值。通过对酶蛋白的改造是获得优良性质酶蛋白的重要来源。针对饲用酶应用的特点,从酶蛋白理性分子设计策略及其技术方...

刘小芸 姚冬生 《中国农业科技导报》 2013年05期 期刊

关键词: / 分子设计 / 热稳定性 / pH稳定性

下载(194)| 被引(3)

耐高温耐酸稳定假密环菌(Armillariella tabescens)MAN47β...  CNKI文献

从已经建立的易错PCR初级突变文库中筛选得到的16个兼具耐酸、高温稳定、高酶活力的克隆出发,将其作为DNA shuffling的亲本基因,利用DNA shuffling技术,结合易化筛选和96微孔板通量筛选的方法获得耐酸、高温稳定的克隆...

吴秀秀 吕晓慧... 《中国生物工程杂志》 2012年03期 期刊

关键词: 定向进化 / β-甘露聚糖酶 / DNA / shuffling

下载(237)| 被引(6)

具蛋白酶抗性的Armillariella tabescens β-甘露聚糖酶MAN...  CNKI文献

利用定点突变的方法提高Armillariella tabescensβ-甘露聚糖酶MAN47的胰蛋白酶抗性。首先根据其氨基酸序列,找到胰蛋白酶的水解位点—赖氨酸(Lys,K)和精氨酸(Arg,R),再利用生物信息学软件获得酶分子结构中K和R与周围...

胡凤娟 王旭曼... 《中国生物工程杂志》 2011年10期 期刊

关键词: 定点突变 / β-甘露聚糖酶 / 重叠延伸PCR / 同源建模

下载(255)| 被引(6)

毛霉Amylomyces.rouxii HN0512中内切葡聚糖酶的诱导、纯化...  CNKI文献

Amylomyces.rouxii HN0512经羧甲基纤维素钠(CMC-Na)诱导,可产内切葡聚糖酶,通过正交试验优化诱导培养基,结果在培养基为1%羧甲基纤维素钠、2%麸皮汁、0.2%蛋白胨(以上均为质量分数)时可以诱导出较高活性的酶,用HiTra...

管明斌 王艳凤... 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 2011年05期 期刊

关键词: 羧甲基纤维素钠 / 内切葡聚糖酶 / 纯化 / Amylomyces.rouxii

下载(95)| 被引(2)

杂色曲菌素HPLC检测方法的建立及其在大米污染样品中的运用  CNKI文献

采用自制杂色曲菌素(VA)标准品,建立大米中杂色曲菌素的高效液相色谱检测方法。大米污染样品经丙酮提取、柱色谱净化,HPLC-紫外检测器进行测定,检测波长288nm。结果表明,VA在100~1250ng/mL质量浓度范围内线性关系良好...

谭辉勇 方明英... 《食品科学》 2010年10期 期刊

关键词: 杂色曲菌素 / 高效液相色谱 / 柱色谱法 / 紫外检测器

下载(148)| 被引(1)

β-激动剂核酸适配体电化学生物传感器的研制  CNKI文献

β-激动剂是苯乙醇胺类化合物在芳香环和末端氨基部位被不同官能团取代而产生的一类化合物。β-激动剂具有营养再分配作用,当食用含有β-激动剂的食物后β-激动剂会在人体内积累引起急性或慢性中毒。因此,建立一个快速...

杨敏 陈丹... 《中国生物工程杂志》 2015年11期 期刊

关键词: β-激动剂 / 适配体传感器 / 电化学检测 / 选择性

下载(235)| 被引(6)

一种酿酒酵母附加型分泌表达载体pYES2/CT/α-factor的构建...  CNKI文献

以pPIC9为模板,通过PCR扩增获得酿酒酵母的α-交配因子(α-factor),并克隆至酿酒酵母胞内表达载体pYES2/CT中,构建了一种新型酿酒酵母附加型分泌表达载体pYES2/CT/α-factor(pYCα)。再将甘露聚糖酶基因(mannase,man)...

胡亚冬 姚冬生 《中国生物工程杂志》 2009年12期 期刊

关键词: 酿酒酵母 / 信号肽 / 分泌表达

下载(662)| 被引(8)

基于分子结构评价的Bacillus subtilis β-1,4-内切木聚糖酶...  CNKI文献

饲料用酶在饲喂过程中,不可避免地会受到消化道中蛋白酶的破坏而令其使用效率受到影响,因此,饲料酶的蛋白酶抗性是其十分重要的性质之一。基于酶反应原理与计算化学理论对Bacillus subtilis 168β-1,4-内切木聚糖酶(X...

虞晓丹 吴秀秀... 《中国生物工程杂志》 2016年08期 期刊

关键词: 理性设计 / 木聚糖酶 / 胰蛋白酶抗性 / 酶稳定性

下载(174)| 被引(0)

黄曲霉毒素B1分解酶的研究  CNKI文献

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姚冬生 2013年饲料毒理学术报告会暨饲料毒理学专业委员会第五届全国... 2013-04-24 中国会议

关键词: 黄曲霉毒素 / 霉菌毒素 / 毒枝菌素 / B1

下载(169)| 被引(0)

对玉米赤霉烯酮有分解作用的微生物的筛选及鉴定  CNKI文献

玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN),是一种酚的二羟基苯酸的内酯结构,因ZEN与雌二醇结构相似,又称F-2毒素,是由镰刀菌属在次级代谢过程中产生的一种较强的雌激素类毒素,在人和动物体内积累可诱发一系列雌激素效应症状,包...

孙志轩 冼钰茵... 2013年饲料毒理学术报告会暨饲料毒理学专业委员会第五届全国... 2013-04-24 中国会议

关键词: 玉米赤霉烯酮 / 生物降解 / 分离 / 菌株鉴定

下载(173)| 被引(1)

四环素核酸适配体电化学生物传感器的研制  CNKI文献

四环素(tetracyclines,TCs)是一类含有骈四苯结构的广谱抗菌药物,价格低廉,可直接作为一种饲料添加剂投放到饲料中,目前被广泛的应用于养殖业、畜禽业、水生生物等领域。在欧盟,四环素类抗生素的使用量占了整个禽畜业...

陈丹 姚冬生... 2013年饲料毒理学术报告会暨饲料毒理学专业委员会第五届全国... 2013-04-24 中国会议

关键词: 四环素 / 核酸适配体 / 电化学 / 检测

下载(159)| 被引(0)

莱克多巴胺核酸适配体电化学生物传感器的研制  CNKI文献

莱克多巴胺(RAC)是苯乙醇胺类β_2-肾上腺素兴奋剂,能够显著提高动物胴体的瘦肉率和降低体内脂肪的沉积率,因而被大量非法用于畜牧生产。食用残留有RAC的动物内脏,常造成人急性或慢性食物中毒。此外,RAC还是一种食源性...

陈丹 周妮... 2013年饲料毒理学术报告会暨饲料毒理学专业委员会第五届全国... 2013-04-24 中国会议

关键词: 莱克多巴胺 / 核酸适配体 / 电化学 / 检测

下载(95)| 被引(0)

Toward rational design of improving enzyme stability  CNKI文献

Enzyme is a group of proteins that produced by living cells,acting as biochemical catalysts to bring about specific biochemical reactions~([1,2]).To function as natural biocatalysts,enzymes bearing s...

吴曦阳 姚冬生 2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集 2015-08-21 中国会议

关键词: Toward / rational / design / of

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