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猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究  CNKI文献

猪圆环病毒2型(PCV2)经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别...

董信田 李玉峰... 《畜牧兽医学报》 2008年05期 期刊

关键词: 猪圆环病毒2型 / 油佐剂 / 氢氧化铝佐剂 / 灭活苗

下载(1290)| 被引(50)

用斑马鱼检测猪链球菌2型的致病力  CNKI文献

【目的】猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)菌株致病力各异,以斑马鱼为实验动物,建立了较为简便可靠的SS2致病力检测方法。【方法】选用1005尾AB系斑马鱼(Danio rerio)以检测SS2不同分离株的致病力。检测8株...

濮俊毅 黄新新... 《中国农业科学》 2007年11期 期刊

关键词: 斑马鱼 / 猪链球菌2型 / 半数致死量

下载(456)| 被引(60)

猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白诱导上皮细胞融合和凋亡  CNKI文献

猪链球菌 2型 (SS2 )溶菌酶释放蛋白 (MRP)的致病作用迄今不明 ,为此 ,以HEp 2细胞为上皮细胞体外模型 ,将纯化的MRP溶液和细胞共孵育 ,光镜观察 ,发现MRP可诱导细胞发生两种典型形态学变化 :一是诱导细胞融合形成多核...

曾巧英 陆承平 《微生物学报》 2003年03期 期刊

关键词: 猪链球菌2型 / 溶菌酶释放蛋白 / 细胞融合 / 细胞凋亡

下载(411)| 被引(159)

猪α干扰素对猪圆环病毒2型亚单位疫苗免疫效果的影响  CNKI文献

为了评估酵母表达的PCV2 Cap蛋白在猪体的免疫特性以及猪α干扰素对其的免疫佐剂效果,将酵母表达的PCV2 Cap蛋白配比适量的铝胶或重组猪α干扰素制成亚单位疫苗。30日龄仔猪分别接种铝胶佐剂亚单位疫苗和猪α干扰素佐...

曹瑞兵 周国栋... 《畜牧兽医学报》 2009年06期 期刊

关键词: 猪圆环病毒2型 / 重组Cap蛋白 / 免疫特性 / 猪α干扰素

下载(687)| 被引(32)

检测猪乙型脑炎病毒抗体间接ELISA方法的建立与应用  CNKI文献

以乙型脑炎病毒(JEV)弱毒疫苗株作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立了检测猪乙型脑炎病毒血清抗体的间接ELISA方法。应用该法检测从江苏、安徽、山东、浙江4省部分地区收集到的1089份血样,对华东地区猪乙...

沈婷 周斌... 《畜牧与兽医》 2010年04期 期刊

关键词: 乙型脑炎病毒 / 间接ELISA / 血清流行病学

下载(790)| 被引(37)

猪流行性腹泻病毒间接ELISA抗体检测方法建立与应用  CNKI文献

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是目前引起我国猪急性肠炎并水样腹泻的重要病原之一,但尚无商品化病毒血清抗体检测试剂盒。本研究以纯化的PEDV为包被抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了间接...

韩蓉 时晓丽... 《畜牧与兽医》 2013年02期 期刊

关键词: 猪流行性腹泻病毒 / ELISA / 抗体

下载(802)| 被引(23)

猪圆环病毒2型感染的检测与流行病学调查  CNKI文献

根据GenBank上发表的PCV2 ORF2和PRRSV ORF7序列设计合成引物,建立分别用于检测PCV2和PRRSV的PCR和RT-PCR方法,并对2003年9月至2005年5月采自189个可疑发病猪场的389份病料进行了PCV2和PRRSV的检测。结果显示,来自33个...

张治涛 李玉峰... 《中国兽医学报》 2008年03期 期刊

关键词: 猪圆环病毒2型 / 流行病学 / 混合感染 / 猪繁殖与呼吸综合征病毒

下载(519)| 被引(42)

人源抗菌肽LL-37在毕赤酵母中的高效表达及其活性检测  CNKI文献

根据GenBank CAA86115中的LL-37氨基酸序列,选择毕赤酵母偏好密码子,采用SOE方法合成了人源抗菌肽LL-37基因。所合成的LL-37基因全长为141bp,并在其N端引入kex2裂解位点,以保证表达抗菌肽具有天然N端。基因克隆入pPIC...

申艳敏 魏建超... 《微生物学通报》 2008年04期 期刊

关键词: 抗菌肽LL-37 / 基因设计 / 分泌表达 / 活性检测

下载(608)| 被引(23)

猪β干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其对伪狂犬病毒的抑制...  CNKI文献

为了研制高活性的重组猪β干扰素,对PoIFN-β成熟蛋白第3、7和164位的3个氨基酸密码子进行毕赤酵母偏嗜性改造并构建了酵母表达载体pPICZαA-PIB。pPICZαA-PIB经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。多株P...

曹瑞兵 周国栋... 《微生物学报》 2006年03期 期刊

关键词: 猪β干扰素 / 毕赤酵母 / 分泌表达 / 伪狂犬病毒

下载(475)| 被引(27)

串联表达PRRSV M与GP5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研...  CNKI文献

利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确。PmeⅠ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,产生重组...

蒋文明 姜平... 《生物工程学报》 2006年04期 期刊

关键词: PRRSV / M / GP5 / 重组腺病毒

下载(460)| 被引(34)

Magainin和cecA-mil抗菌肽基因的密码子优化及在毕赤酵母中...  CNKI文献

选用毕赤酵母偏爱密码子 ,设计合成了新型抗菌肽基因。所合成的magainin基因和cecA mil杂合肽基因全长分别为 1 0 1bp和 60bp ,并在其N端引入kex2裂解位点 ,以保证表达抗菌肽具有天然N端。其中 ,cecA mil杂合肽基因根...

张素芳 贾赟... 《中国生物工程杂志》 2004年07期 期刊

关键词: 抗菌肽 / 基因改造 / SOE / 毕赤酵母

下载(656)| 被引(49)

猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪细小病毒混合感...  CNKI文献

根据GenBank上发表的PRRSVORF7、PPVVP2及PCV的基因组序列设计合成引物,建立了分别用于检测PRRSV、PPV和PCV的RT-PCR、PCR及复合PCR方法。应用建立的复合PCR方法对送检的127份病料进行了PCV的检测,对鉴定为PCV2阳性的...

贾赟 芦银华... 《中国病毒学》 2004年05期 期刊

关键词: 猪圆环病毒2型 / 猪繁殖与呼吸综合征病毒 / 猪细小病毒 / 混合感染

下载(587)| 被引(89)

表达猪流行性腹泻病毒S基因片段重组腺病毒的构建与免疫特性  CNKI文献

利用RT-PCR、同源重组等技术构建了含有猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因上3个片段的重组腺病毒质粒pAd-S498~638,pAd-S1~638,pAd-S498~1384,经PacI酶切后转染HEK-293A细胞,3次噬斑纯化分别获得了重组腺病毒rAd-S498~...

韦显凯 侯继波... 《中国兽医学报》 2008年10期 期刊

关键词: 猪流行性腹泻病毒 / 重组腺病毒 / S基因 / 免疫原性

下载(405)| 被引(40)

PRRSV与PCV2体外共感染对猪肺泡巨噬细胞免疫学功能的影响  CNKI文献

制备猪肺泡巨噬细胞,分别接种PCV2、PRRSV、PCV2+PRRSV(先接种PCV2,12h后接种PRRSV)、PRRSV+PCV2(先接种PRRSV,12h后接种PCV2)、PRRSV/PCV2(同时接种)和对照组。接种后不同时间观察细胞病变(CPE),并用real-time PCR和...

冯志新 姜平... 《中国预防兽医学报》 2007年12期 期刊

关键词: PRRSV / PCV2 / 共感染 / 猪肺泡巨噬细胞

下载(648)| 被引(31)

副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立与应用  CNKI文献

通过反应条件的优化、特异性和敏感性的测定,建立了一种快速、简便、准确的PCR方法,用于检测副猪嗜血杆菌(HPs)。PCR扩增片段大小为822bp,最小检测量为1080个HPs。与大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和链球菌无特异...

尹秀凤 王艳... 《中国兽医学报》 2007年02期 期刊

关键词: 副猪嗜血杆菌 / 检测 / PCR

下载(622)| 被引(42)

对虾白斑综合征病毒在螯虾动物模型的感染特性  CNKI文献

应用克氏原螯虾作为动物模型研究对虾白斑综合征病毒 (WSSV)的感染增殖特性 ,涉及感染温度、感染途径、继发感染、半数致死量 (LD50 )、免疫保护及保存期等。结果显示 ,2 2~ 2 5℃时 ,接种WSSV的螯虾一般于 2~7d内死...

朱建中 陆承平 《水产学报》 2001年01期 期刊

关键词: 克氏原螯虾 / 白斑综合征病毒 / 感染温度 / 感染途径

下载(329)| 被引(75)

抗菌肽天蚕素B基因及其串联体在毕赤酵母中的表达  CNKI文献

通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点。亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用SacⅠ酶切...

王秀青 张素芳... 《南京农业大学学报》 2007年03期 期刊

关键词: 天蚕素B / 抗菌肽 / 毕赤酵母 / 表达

下载(539)| 被引(35)

H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因的原核表达及间接ELISA方法的...  CNKI文献

根据GenBank公布的H5N1亚型禽流感病毒 (AIV)血凝素 (HA)基因序列设计引物 ,用PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒HA1基因 ,将该片段定向插入到原核表达载体pET_32a(+)中 ,构建原核表达载体pET_HA1。阳性质粒转化宿主菌BL...

郑其升 张晓勇... 《微生物学报》 2005年01期 期刊

关键词: H5N1亚型禽流感病毒 / 血凝素基因 / 原核表达 / iHA-ELISA

下载(644)| 被引(44)

杂合抗菌肽CecA_mil的改造及在毕赤酵母中的分泌表达  CNKI文献

参照毕赤氏巴斯德酵母 (Pichiapastoris)偏好密码子 ,改造并化学合成杂合抗菌肽CecA_mil基因 ,改造后的CecA_mil基因克隆到pPICZα_A载体中 ,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα_A_CM ,转化Pichiapastoris受体菌X_33。...

张素芳 曹瑞兵... 《微生物学报》 2005年02期 期刊

关键词: 杂合抗菌肽CecA-mil / Pichiapastoris / 分泌表达 / 抑菌活性

下载(482)| 被引(33)

用单克隆抗体展示猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白在菌体表面的形...  CNKI文献

用猪链球菌 2型江苏分离株HA980 1全菌免疫Balb/c小鼠 ,取其脾细胞和Sp2 / 0细胞融合 ,以电泳纯溶菌酶释放蛋白 (MRP)为抗原 ,间接ELISA筛选MRP抗体阳性孔并用有限稀释法单克隆化 ,剔除与胞壁杂蛋白交叉反应阳性的克隆...

曾巧英 陆承平 《中国农业科学》 2004年01期 期刊

关键词: 猪链球菌2型 / 溶菌酶释放蛋白 / 单克隆抗体 / 激光共聚焦显微术

下载(248)| 被引(43)

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