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OS-9基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备  CNKI文献

OS 9基因广泛表达于人体多种组织 ,该基因的表达产物可能与肿瘤的发生相关 .为获得可溶性表达的OS 9蛋白 ,制备多克隆抗体 ,深入了解OS 9基因的功能 ,将OS 9基因片段克隆入组氨酸标签融合的表达载体pET2 8a中 ,IPTG诱...

韩月恒 张文红... 《中国生物化学与分子生物学报》 2003年03期 期刊

关键词: OS9基因 / 融合表达 / 金属螯合亲和层析 / 多克隆抗体

下载(173)| 被引(26)

水飞蓟素对乳腺癌细胞系的作用及其机制研究  CNKI文献

目的 研究水飞蓟素在体外对不同乳腺癌细胞系的作用 ,并进一步探讨其作用机制。方法  MTT实验测定水飞蓟素对乳腺癌细胞系 MCF- 7和 SK- BR- 3的半数抑制浓度 ( IC50 ) ;软琼脂克隆形成试验检测加药后两种细胞在软琼...

韩月恒 韩炯... 《中草药》 2003年03期 期刊

关键词: 水飞蓟素 / 乳腺癌 / Her-2 / AG825

下载(207)| 被引(12)

抗肿瘤中药成分的筛选及作用机理研究  CNKI文献

自然界中植物种类多种多样,可用于肿瘤治疗的植物药也是数量繁多,如果能将其中起主要作用的有效成分分离出来,研究其理化性质及作用机理,对于抗肿瘤新药的研制开发将具有非常重要的意义。 为此,我...

韩月恒 导师:药立波 中国人民解放军第四军医大学 2003-05-01 博士论文

关键词: 中药 / 姜黄素 / 水飞蓟素 / 分子机理

下载(1636)| 被引(1)

Tec家族蛋白酪氨酸激酶Itk PH结构域与OS-9蛋白的相互作用  CNKI文献

用酵母双杂交技术筛选与ItkPH结构域相互作用的蛋白分子 ,以了解Itk的功能及其在T细胞信号转导中的位置与作用 .Itk的PH结构域扩增后克隆入酵母双杂交系统的pLexA载体 ,转化酵母细胞EGY4 8(p8op lacZ) ,经检测PH结构域...

韩月恒 张文红... 《中国生物化学与分子生物学报》 2003年04期 期刊

关键词: Itk / PH结构域 / 酵母双杂交系统 / OS-9

下载(136)| 被引(4)

Tec家族蛋白酪氨酸激酶Itk的研究进展  CNKI文献

T淋巴细胞表面T细胞受体 (TCR )、辅助分子和细胞因子受体等介导的信号转导主要是通过细胞内底物的酪氨酸磷酸化来完成的。由于这些受体或辅助分子往往不含固有的激酶结构域 ,因此信号传递势必通过它们与细胞内蛋...

韩月恒 药立波... 《上海免疫学杂志》 2000年02期 期刊

关键词: 蛋白酪氨酸激酶 / 磷酸化 / 激酶活性 / 家族

下载(174)| 被引(2)

Tec家族蛋白酪氨酸激酶ItkPH结构域的克隆鉴定及其在酵母双...  CNKI文献

Tec家族蛋白酪氨酸激酶Itk特异地表达于T细胞 ,对T细胞的成熟与活化等具有很大影响 ,因而可能在T细胞的信号转导过程中处于重要位置。我们利用PCR的方法从含Itk基因全长cDNA的pME18S EMT质粒中扩增出其PH结构域基因片...

韩月恒 张晓光... 《上海免疫学杂志》 2000年02期 期刊

关键词: Itk / PH结构域 / 酵母双杂交系统 / 自激活作用

下载(69)| 被引(0)

葡萄籽提取物原花青素诱导胃癌细胞脱落凋亡  CNKI文献

目的 研究葡萄籽提取物原花青素诱导胃癌细胞脱落凋亡的作用。方法 采用细胞形态学观察、Annxin V和PI细胞染色实验和流式细胞仪检测方法观察原花青素对悬浮培养的胃癌细胞生长状态和细胞周期的影响以及诱导脱落凋亡...

李莹 药立波... 《中国药理学通报》 2004年07期 期刊

关键词: 原花青素 / 脱落凋亡 / 胃癌细胞

下载(455)| 被引(39)

RNAi引起的Paxillin和p130Cas下调抑制胃癌细胞失巢性生长  CNKI文献

P130Cas和paxillin分子是整合素家族下游重要的衔接分子.为了探索这两个分子在肿瘤细胞抗失巢凋亡中的作用,应用RNAi技术分别抑制抗失巢凋亡的胃癌细胞BGC82 3中paxillin和p130cas基因的表达,观察它们对细胞失巢性生长...

李莹 药立波... 《中国生物化学与分子生物学报》 2005年03期 期刊

关键词: RNAi / 失巢凋亡 / paxillin / p130Cas

下载(364)| 被引(20)

EphB2胞外不同结构域在酵母双杂交系统中自激活作用的检测  CNKI文献

EphB2Erk,Hek5,Cek5,Nuk,Qek5,Tyro4和Drt属于酪氨酸蛋白激酶受体RTK中成员最多的家族Eph亚族,其命名〔1〕源自该最早的成员Eph受体erythropoietinp...

张晓光 韩月恒... 《细胞与分子免疫学杂志》 2001年02期 期刊

关键词: EphB2 / 酵母双杂交 / pGBT9 / 配体

下载(50)| 被引(1)

Ndrg2基因及NDRG2蛋白的生物信息学分析  CNKI文献

目的 :对ndrg2 (n mycdownsreamregulatorgene 2 )基因调控区和NDRG2蛋白序列进行生物信息学分析 ,从结构上预测其功能 .方法 :运用internet网络上的数据库及程序 ,对ndrg2基因的调控区和NDRG2蛋白的二级结构进行生物...

张文红 刘新平... 《第四军医大学学报》 2003年17期 期刊

关键词: ndrg2基因 / NDRG2蛋白 / 生物信息学分析 / α/β水解酶

下载(676)| 被引(23)

T4DNA连接酶对电转化效率的影响  CNKI文献

目的探讨T4DNA连接酶影响电转化效率的机制并寻找提高电转化效率的方法。方法将1μg噬粒pDAN5加入到连接反应体系中并进行沉淀、热灭活以及酚氯仿抽提等各种处理后进行电转化。结果热灭活、酚氯仿抽提、热灭活后沉淀及...

王福利 赵爱志... 《中国现代医学杂志》 2011年17期 期刊

关键词: T4DNA连接酶 / 电转化

下载(435)| 被引(8)

白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡  CNKI文献

目的 研究白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡的作用。方法 采用细胞形态学观察、Annxin-V和PI细胞染色和流式细胞仪检测,观察白藜芦醇(0.1、0.2、0.5 mmol/L)对脱落培养胃癌细胞B(3C823、SGC7901和HGC27的生长状态、细胞周...

李莹 药立波... 《中草药》 2004年10期 期刊

关键词: 白藜芦醇 / 脱落凋亡 / 胃癌细胞

下载(258)| 被引(12)

虎仗提取物白藜芦醇诱导胃癌细胞HGC27凋亡  CNKI文献

目的 :观察虎仗提取物白藜芦醇对胃癌细胞HGC2 7细胞周期和增殖的影响及凋亡诱导作用 .方法 :采用MTT法和软琼脂集落形成实验观察白藜芦醇对细胞增殖的影响 ,Annxin V&PI染色及流式细胞仪检测观察白藜芦醇对细胞周...

李莹 药立波... 《第四军医大学学报》 2004年19期 期刊

关键词: 白藜芦醇 / 凋亡 / 胃肿瘤 / 肿瘤细胞

下载(253)| 被引(11)

大容量人乳腺癌单链抗体库的构建与初步鉴定  CNKI文献

目的利用细胞内重组技术构建大容量人乳腺癌单链抗体(scFv)库。方法收集30例乳腺癌外周转移淋巴结,依次提取总RNA、mRNA,RT-PCR扩增全套可变区基因(VL、VH),各自克隆到T载体,构建T载体库。然后从T载体上酶切VL、VH分步...

吕勇刚 窦科峰... 《现代肿瘤医学》 2006年02期 期刊

关键词: 噬菌体抗体库 / 单链抗体 / 乳腺癌 / T-载体

下载(150)| 被引(11)

兔抗人NDR2高效价抗血清的制备、纯化及鉴定  CNKI文献

目的 制备高效价的 NDR2抗体 .方法 构建p Rset- A- ndr2 ,p GEX- 4 T- 1- ndr2 - a和 p GEX- 4 T- 1- ndr2 - b三种重组表达质粒 ,并分别在大肠杆菌中诱导表达相应的融合蛋白 ;用全长 GST- NDR2蛋白免疫兔 ,然后用...

张文红 刘新平... 《第四军医大学学报》 2002年08期 期刊

关键词: NDR2 / 基因 / Myc表达 / 免疫血清

下载(117)| 被引(12)

胃癌细胞抗脱落凋亡的分子机制  CNKI文献

目的探求胃癌细胞抗脱落凋亡的信号转导机制。方法用soft agar实验观察信号分子抑制剂对胃癌细胞非锚定生长的影响,流式细胞仪检测信号分子抑制剂对脱落培养胃癌细胞周期的影响及凋亡诱导作用,Western印迹检测胃癌细胞...

李莹 药立波... 《医学分子生物学杂志》 2004年02期 期刊

关键词: 凋亡 / 胃癌细胞 / 信号转导

下载(184)| 被引(4)

在酵母双杂交系统中筛选与Tec家族蛋白酪氨酸激酶Itk PH结构...  CNKI文献

T淋巴细胞表面受体(TCR)、辅助分子(如CD28、CD2)及细胞因子受体等介导的信号转导主要是通过细胞内底物的酪氨酸磷酸化来完成的.由于这些受体或辅助分子往往不含固有的激酶结构域,信号的传递势必通过它们与细胞内蛋白...

韩月恒 张晓光... 中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会... 2001-09-01 中国会议

关键词: 结构域 / Tec / 酵母双杂交 / Itk

下载(21)| 被引(0)

NDRG2蛋白的毕赤酵母可溶表达与纯化  CNKI文献

目的 :酵母表达并纯化可溶性NDRG2蛋白 .方法 :从 pRSET A ndrg2重组质粒中扩增出 6his ndrg2融合基因 ,克隆入酵母表达载体 pPIC3.5K ;酵母重组表达载体pPIC3.5K 6his ndrg2电转化入毕赤酵母GS115 ,并进行营养缺陷筛...

张文红 刘新平... 《第四军医大学学报》 2003年12期 期刊

关键词: NDRG2蛋白 / 毕赤酵母 / 基因表达 / 亲合纯化

下载(96)| 被引(2)

人髓性白血病细胞系U937定向克隆cDNA表达文库的构建及其意...  CNKI文献

本研究的目的是构建髓性白血病U937细胞系表达型cDNA文库 ,为肿瘤抗原的筛选奠定工作基础。提取U937细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5′端 ;XhoⅠ酶切...

陈刚 张王刚... 《中国实验血液学杂志》 2003年04期 期刊

关键词: U937细胞系 / 髓性白血病细胞系 / cDNA表达文库

下载(85)| 被引(1)

HBsAg与恒定链融合基因真核表达载体的构建及鉴定  CNKI文献

我国是乙型病毒性肝炎的高发国家 ,约有 1.2亿的HBV携带者 ,而原发性肝癌中 90 %的患者有HBV感染[1] 。研究者发现 ,72 .7%的肝癌癌旁组织及 4 5 %的肝癌组织中可检出HBsAg,故其可作为肝炎后肝癌患者免疫治疗的相对特...

白俊 任军... 《细胞与分子免疫学杂志》 2004年06期 期刊

关键词: 恒定链 / HBsAga位点 / 外来体

下载(55)| 被引(3)

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