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介绍一种简单高效的植物总RNA提取方法  CNKI文献

在液氮中研磨小麦幼叶和不同发育时期的种子 ,经含 0 .1%SDS和 0 .1%十二烷基肌氨酸钠 (LDS)的尿素缓冲液裂解后 ,醋酸钠和氯仿沉淀变性蛋白质 ,异丙醇沉淀核酸 ,溶解后经 2 .5mol/LLiCl沉淀总RNA ,洗涤后就可得到高质...

赵双宜 吴耀荣... 《遗传》 2002年03期 期刊

关键词: 植物RNA分离提取 / 尿素 / 氯化锂

下载(1120)| 被引(110)

萝卜雄性不育系个体发育中的同工酶研究  CNKI文献

利用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳对四个萝卜雄性不育系和保持系营养生长期的叶片和生殖生长期的花药进行了过氧化物酶同工酶、细胞色素氧化酶同工酶和脂酶同工酶的分析,结果表明:在生殖生长期,雄性不育系的过氧化物...

赵双宜 粟翼玟... 《中国农业科学》 1994年01期 期刊

关键词: 萝卜雄性不育 / 聚丙烯酰胺凝胶电泳 / 过氧化物酶同工酶 / 脂酶同工酶

下载(122)| 被引(61)

转牛酪蛋白基因(α_(s1)—CaseinB)cDNA花生后代的种子蛋白...  CNKI文献

对花生转牛酪蛋白基因cDNA子二代 ,1 4株种子胚和子叶全蛋白的SDS—PAGE电泳分析表明 ,与对照比较 7株子二代中均有一条新的蛋白质带 ,并在子叶和胚中大量表达 .对 3株子二代及对照花生幼苗叶片的Gus酶活性检测表明 :...

赵双宜 姚红艳 《山东大学学报(自然科学版)》 2001年04期 期刊

关键词: 种子蛋白 / Gus酶活性检测 / CaseinB基因

下载(154)| 被引(1)

牛酪蛋白cDNA基因克隆的改建  CNKI文献

牛酪蛋白全长cDNA克隆pB_aS_1C184经Bgl Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切,回收其中的酪蛋白基因编码片段,与经BamH Ⅰ、SmaⅠ双酶切的植物表达载体pBI121.2分两步连接:第一步载体的BamHⅠ末端与酪蛋白基因的BglⅠ粘性末端连接;第二...

赵双宜 张燕君... 《山东大学学报(自然科学版)》 1996年04期 期刊

关键词: 酪蛋白基因cDNA / pBIl21.2载体 / 点杂交 / 基因克隆的改建

下载(47)| 被引(2)

植物耐盐相关基因及其耐盐机制研究进展  CNKI文献

植物的耐盐性是一个复杂的数量性状,涉及诸多基因和多种耐盐机制的协调作用。本文综述了近年来国内外在植物耐盐分子方面的研究成果与最新进展。Na+/H+反向转运蛋白、K+转运体HAK和K+转运的调控基因AtHAL3a、高亲和性...

单雷 赵双宜... 《分子植物育种》 2006年01期 期刊

关键词: 植物 / 耐盐基因 / 耐盐机制

下载(2972)| 被引(86)

小麦体细胞杂种山融3号耐盐相关SSR标记的筛选和初步定位  CNKI文献

【目的】寻找并定位与小麦耐盐性有关的SSR标记。【方法】选取耐盐性强的体细胞杂交新品种山融3号为试验材料。以山融3号为母本,盐敏感的常规品种济南17为父本,配制杂交组合(01组合)。利用SSR-BSA(bulkedsegregantana...

单雷 赵双宜... 《中国农业科学》 2006年02期 期刊

关键词: 小麦体细胞杂种 / 耐盐基因 / SSR标记 / 染色体定位

下载(364)| 被引(50)

植物RNA沉默机制的研究进展  CNKI文献

RNA沉默是真核生物中普遍存在的抵抗病毒复制表达、抑制转座子转座及调控基因表达的监控机制。植物中的RNA沉默 (转录水平的基因沉默PTGS)在RdRP的作用、transitiveRNAi的双向延伸、沉默效应的系统性传播等方面与动物...

赵庆臻 赵双宜... 《遗传学报》 2005年01期 期刊

关键词: RNA沉默 / 转录后基因沉默 / RNA指导的RNA聚合酶 / 小干扰RNA

下载(1365)| 被引(37)

植物抗白粉病的分子机理  CNKI文献

随着分子生物学与其相关技术的飞速发展 ,已克隆到了一系列的植物抗病基因和防御基因 ,加深了对植物与病原微生物相互作用分子机制的了解 ,促进了植物抗病分子机理的研究。国内外许多学者对大麦抗白粉病的分子机制进行...

吴耀荣 赵双宜... 《中国生物工程杂志》 2002年03期 期刊

关键词: 白粉病 / 抗性机理 / 过敏性反应 / 基因工程

下载(476)| 被引(31)

改良尿素-氯化锂方法提取成熟小麦种子总RNA  CNKI文献

为了分离提取成熟小麦种子总RNA ,去除多糖等杂质的严重干扰 ,本实验对尿素 氯化锂分离RNA的方法做了三个方面的改进 :一、去除成熟种子的胚 (含大量麦胚凝集素等糖蛋白 ) ,发现裂解物的黏稠度明显下降 ;二、在裂解粗...

姚红艳 赵双宜... 《中国生物工程杂志》 2003年04期 期刊

关键词: 小麦成熟种子 / RNA提取 / 尿素氯化锂 / CTAB

下载(320)| 被引(40)

根癌农杆菌介导大麦Mlo反义基因转化小麦  CNKI文献

应用含有大麦Mlo反义基因表达载体的根癌农杆菌菌株AglⅠ ,对 3种基因型小麦 (核生 3号、烟优 36 1、扬麦15 8)的愈伤组织进行了转化 .从其中 2种基因型获得 2 3株转基因植株 ,有 2株是白化苗 ,转化频率分别为 1.9%(核...

秦余香 赵双宜... 《山东大学学报(理学版)》 2004年05期 期刊

关键词: 小麦 / 根癌农杆菌 / 转基因植株 / 大麦Mlo反义基因

下载(187)| 被引(21)

甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA片段的克隆  CNKI文献

根据在GenBank中登录的番茄、胡萝卜和柑桔等酸性转化酶基因的保守序列设计引物 ,采用RT -PCR方法 ,从甜瓜果实总RNA中扩增出目标cDNA片段 ,克隆到pMD18 T载体中。序列分析表明 ,它与其它植物的酸性转化酶基因的同源性...

于喜艳 赵双宜... 《园艺学报》 2003年03期 期刊

关键词: 甜瓜 / 果实 / RT-PCR / 酸性转化酶基因

下载(227)| 被引(31)

萝卜雄性不育系小孢子发生的细胞形态学研究  CNKI文献

对秋冬萝卜雄性不育系64A及其保持系64B小孢子形态发生中不同发育时期的花药和小孢子的观察表明,不育系中从四分体初释放的单核小孢子与正常者无可见差异;当单核小孢子内开始出现小液泡时即呈现败育:胞质淡染...

粟翼玟 赵双宜... 《园艺学报》 1995年04期 期刊

关键词: 萝卜 / 雄性不育性 / 小孢子形态发生

下载(186)| 被引(65)

小麦幼叶cDNA文库的构建  CNKI文献

提取小麦辉县红的三叶期幼叶总RNA ,利用RNA5’端模板转换技术 (SMART ,theSwitchMechanismAtthe 5’endofRNATranscript)合成cDNA的第一链 ,再经 2 1个循环的长距离PCR(LD PCR)合成双链cDNA ,经蛋白酶K消化、纯化cDN...

吴耀荣 赵双宜... 《山东大学学报(理学版)》 2003年02期 期刊

关键词: 小麦 / 幼叶 / SMART / cDNA文库

下载(225)| 被引(18)

中国萝卜皮色遗传的初步研究  CNKI文献

通过对中国萝卜(RaphanussativusL.var.LongipinnatusBailey)不同皮色试材的杂交,F1、F2自交,研究了皮色遗传表现。初步结果表明,皮部绿色(即绿皮)依不同杂交组合...

何启伟 赵双宜... 《山东农业科学》 1997年02期 期刊

关键词: 中国萝卜 / 皮色 / 遗传控制

下载(180)| 被引(19)

TuMV-Nib反义基因对大白菜的遗传转化研究  CNKI文献

以‘福山包头’大白菜子叶为试材,以Anti-TuMV-Nib为目的基因,利用根癌农杆菌介导法,建立了大白菜再生转化体系,获得转化植株。经PCR-Southern杂交、RT-PCR及ELISA检测,证明外源TuMV-Nib基因已整合到大白菜核基因组中...

于占东 赵双宜... 《园艺学报》 2006年05期 期刊

关键词: 大白菜 / 芜菁花叶病毒 / 复制酶基因 / 遗传转化

下载(156)| 被引(13)

萝卜雄性不育系与保持系叶绿体基因组离体翻译产物的比较  CNKI文献

以萝卜雄性不育系8418A及其保持系8418B为材料,经不连续Percol梯度分离出完整叶绿体,以35S-甲硫氨酸标记离体叶绿体合成的蛋白质,对类囊体膜蛋白和基质蛋白分别经SDS-PAGE分离和放射自...

张燕君 赵双宜... 《园艺学报》 1999年02期 期刊

关键词: 萝卜 / 雄性不育性 / 叶绿体基因组 / 翻译产物

下载(103)| 被引(20)

番茄果实酸性转化酶基因cDNA片段的克隆  CNKI文献

根据酸性转化酶基因的保守序列设计引物 ,采用RT PCR方法 ,从番茄果实总RNA中扩增出目标cDNA片段 ,克隆到pMD18 T载体中。在所测的 10 38个核苷酸中 ,与GenBank中登记号为M810 81的番茄果实酸性转化酶基因高度同源 ,同...

于喜艳 赵双宜... 《中国蔬菜》 2002年06期 期刊

关键词: 番茄 / RTPCR / 酸性转化酶基因

下载(124)| 被引(6)

通过花萼管注射法获得转基因花生研究初报 I.部分后代叶片...  CNKI文献

对Gus和牛酪蛋白嵌合基因注入花生栽培种花萼管获得的3 株后代叶片Gus活性作了荧光测定。结果表明,其中1 株呈强Gus活性,证明Gus基因已成功转入花生并获得表达。

王传堂 赵双宜... 《花生科技》 1999年S1期 期刊

关键词: 花生 / 花萼管注射法 / 转基因 / Gus活性

下载(128)| 被引(4)

牛酪蛋白基因导入大豆的研究  CNKI文献

将带有牛酪蛋白基因caseinB的植物表达载体 pAS -2 ,在大豆自花授粉后 ,用注射法导入大豆受精子房中 .以质粒 pAS -2的 3 5S -Casein -Gus片段为模板 ,随机引物法标记探针 ,对 1 0 3株受体植株后代的DNA进行点杂交和S...

张燕君 赵双宜... 《山东大学学报(自然科学版)》 2000年03期 期刊

关键词: 大豆 / 牛酪蛋白基因 / DNA导入 / 分子杂交

下载(41)| 被引(6)

高粱肉桂酸羟化酶基因SbC4H1降低拟南芥的木质素合成  CNKI文献

肉桂酸羟化酶(C4H)是苯丙烷代谢通路的关键酶,其活性和含量直接影响木质素合成的效率。本文研究通过高粱bmr突变体的抑制差减杂交筛选、克隆到了一个C4H基因SbC4H1。半定量RT-PCR发现,SbC4H1在多个bmr突变体中上调表达...

闫丽 夏光敏... 《植物生理学报》 2013年12期 期刊

关键词: 高粱 / 肉桂酸4-羟化酶 / 木质素合成 / 生物能源

下载(250)| 被引(9)

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