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黄花蒿培养细胞中青蒿素合成代谢的体外调节  CNKI文献

黄花蒿培养细胞通过两步培养积累青蒿素.第1步在含有0.2~0.4mg/L6-苄基氨基嘌呤(6-BA)和3~4mg/L吲哚乙酸(IAA)的N6培养基中进行细胞的增殖培养,第2步将培养好的细胞转入含0.2...

李弘剑 张毅... 《中国生物化学与分子生物学报》 1999年03期 期刊

关键词: 黄花蒿 / 青蒿素 / 植物细胞培养 / 代谢调节

下载(643)| 被引(50)

体外胁迫促进青蒿素在黄花蒿培养细胞中合成的研究  CNKI文献

在黄花蒿细胞悬浮培养合成青蒿素的过程中添加微生物刺激剂和微生物胞外酶刺激剂 ,测定刺激剂对青蒿素合成的影响。采用的微生物刺激剂为霉菌AS34,30 9和AS3 ,346、酵母Kluyberomycesfragilis及细菌AS1,398的提取物 ,...

李弘剑 张毅... 《药物生物技术》 2001年01期 期刊

关键词: 黄花蒿 / 青蒿素 / 刺激剂 / 植物细胞培养

下载(312)| 被引(20)

黄花蒿细胞培养过程中细胞生长及青蒿素生物合成的调节控制  CNKI文献

植物细胞培养的人工环境中诸如植物生长调节剂、营养因子和刺激剂等代谢控制信号可以调节控制植物细胞生长和次级代谢产物的生物合成。我们对黄花蒿细胞培养过程中黄花蒿细胞生长及青蒿素生物合成调节控制研究的目的在...

李弘剑 导师:姚汝华 华南理工大学 1994-05-01 博士论文

关键词: 青蒿素 / 黄花蒿 / 植物细胞培养 / 刺激剂

下载(513)| 被引(6)

基因体外随机突变的两种方法的研究  CNKI文献

引导蛋白质功能进化常用的方法是模拟和加速蛋白质基因自然重组的进程 ,即在蛋白质的基因中引进随机突变。因此 ,蛋白质基因体外随机突变的方法影响着引导蛋白质功能进化的效果。本文描述两种简单而有效的基因体外随机...

李弘剑 张毅... 《遗传》 2000年02期 期刊

关键词: 定向进化 / 化学突变 / 延伸突变 / 过氧化氢酶I

下载(303)| 被引(10)

生物量对黄花蒿悬浮培养细胞生长的影响  CNKI文献

黄花蒿细胞悬浮培养过程中,分别以10、30、60、80g/L的接种量进行细胞生长的对比实验.在所述培养条件下的最适起始细胞浓度为鲜重60g/L培养基.起始培养的细胞浓度直接影响细胞的生长周期增殖倍数....

李弘剑 张毅... 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 1997年05期 期刊

关键词: 黄花蒿细胞 / 悬浮培养 / 生物量 / 生长周期

下载(122)| 被引(30)

工程菌JM-109-pTrcHis2A-phyA表达植酸酶的研究  CNKI文献

目的 :将来源于黑曲霉的植酸酶基因重组于大肠杆菌表达载体pTrcHis2A中 ,导入大肠杆菌JM10 9中 ,构建工程菌JM - 10 9-pTrcHis2A -phyA .方法 :基因重组 ,以及克隆和外源基因诱导表达技术 .结果 :该工程菌能够有效地表...

李弘剑 陈震球... 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 2001年05期 期刊

关键词: 植酸酶 / 植酸 / 黑曲霉 / 大肠杆菌

下载(76)| 被引(25)

过氧化氢酶Ⅰ结构延伸突变改善酶热稳定性的初步研究  CNKI文献

嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶Ⅰ及其取代突变酶88(25)的延伸突变是指在酶蛋白的C末端上连接一段随机肽链,从而改变了酶蛋白的结构.研究结果表明,这种延伸突变的方法非常有效地提高了酶的热稳定性,并且随机肽...

李弘剑 张毅 《生物化学杂志》 1997年04期 期刊

关键词: 延伸突变 / 过氧化氢酶Ⅰ / 热稳定性 / 嗜热脂肪芽孢杆菌

下载(121)| 被引(8)

人工核酶M_1GS结构与功能相互关系的研究  CNKI文献

目的:研究核酶M1GS其二级结构与体外切割活性之间的关系。方法:以人巨细胞病毒(HCMV)DNA聚合酶基因UL54为靶基因,构建了人工核酶M1GS-T7。通过软件RNAstructure对M1GS在3个具有相对稳定结构的温度(20℃、37℃、55℃)的...

李弘剑 孙亮... 《中国病理生理杂志》 2006年06期 期刊

关键词: 温度 / 突变 / 基因 / UL54

下载(130)| 被引(3)

豌豆来源的毒性抗虫白蛋白cDNA在毕赤酵母中异源表达及抗虫...  CNKI文献

一种来源于豌豆的白蛋白 (PA)对多种昆虫具有明显的毒性作用 .为了进一步研究其抗虫机理 ,采用基因工程的方法富集蛋白质 .将该白蛋白基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA .并导入毕赤酵母菌GS115中表达 .通过P...

李弘剑 张毅... 《中国生物化学与分子生物学报》 2004年01期 期刊

关键词: 杀虫剂 / 豌豆白蛋白 / 异源表达 / 毕赤酵母

下载(131)| 被引(2)

GS介导RNase P对人巨细胞病毒ul54基因mRNA的切割作用  CNKI文献

引导序列(Guide Sequences,GSs)是与mRNA靶序列互补并引导RNase P切割的小RNA片段。设计与人巨细胞病毒HCMV(Human Cytomegalovirus,HCMV)ul54基因D片段mRNA序列互补的GS,将其共价结合到大肠杆菌来源RNase P催化核心M...

李弘剑 黎景光... 《病毒学报》 2006年04期 期刊

关键词: 人巨细胞病毒HCMV / ul54基因 / RNaseP / 引导序列(GSs)

下载(129)| 被引(1)

番木瓜细胞形态变化与蛋白酶积累过程的研究  CNKI文献

番木瓜细胞在含0.1mg/L NAA、0.5mg/L 6—BA的B_5培养基中,25℃避光培养。随着培养的继续,细胞形态发生变化。用电子显微镜扫描观察,培养前二十天,细胞处于生长旺盛阶段,形态饱满、密度大、生命力强,代谢旺盛,大量积累...

李弘剑 郭勇... 《华南理工大学学报(自然科学版)》 1993年01期 期刊

关键词: 植物组织与细胞培养 / 番木瓜 / 木瓜蛋白酶 / 细胞形态学

下载(55)| 被引(6)

浅谈非生物类专业的生物学基础教育  CNKI文献

阐述了在非生物类专业全面开展生物学基础教育的重要意义 ,以及国内外非生物类专业生物学教学现状 ,并介绍了目前全国各高校在非生物类专业开设的生物学课程

李弘剑 《暨南学报(哲学社会科学版)》 2001年S1期 期刊

关键词: 非生物类专业 / 生物学教育 / 高等院校

下载(94)| 被引(2)

番木瓜细胞悬浮培养中细胞生长及过氧化氢酶的研究  CNKI文献

按常规植物细胞培养技术获得的20天种龄的番木瓜(Carica papaya)愈伤组织,悬浮于分别含有0.3%酵母膏的MS_3-CM及B_5培养基中,于25℃、100 r╱min 进行振荡培养,测定细胞生长(根据细胞湿重)和过氧化氢酶活性的结果表明...

李弘剑 郭勇... 《植物生理学通讯》 1991年04期 期刊

关键词: 细胞生长 / 过氧化氢酶 / 番木瓜 / 多年生草本果

下载(57)| 被引(0)

基因重组胰高血糖素样肽-1衍生多肽的表达和产物纯化与鉴定  CNKI文献

为研究利用基因重组方法生产人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)衍生多肽的最佳表达及纯化条件,选用大肠杆菌偏爱密码子,以含人GLP-1的质粒为模板,用PCR方法合成全长人GLP-1衍生多肽基因,并定向插入到高效表达载体pMFH中,用大...

马义 李弘剑... 《中国生物工程杂志》 2009年06期 期刊

关键词: 基因重组 / 胰高血糖素样肽-1衍生多肽 / 高效液相色谱 / 质谱

下载(361)| 被引(4)

大蒜细胞悬浮培养中细胞生长与产酶的研究  CNKI文献

当大蒜细胞培养在MS液体培养基中,细胞生长迅速,脱分化的细胞仍具有合成和积累SOD的能力.培养15天,大蒜细胞生长和SOD酶积累都达到高峰期,细胞合成量鲜重为120.8g/L,细胞单位酶活力为每克细胞...

张毅 李弘剑... 《华南理工大学学报(自然科学版)》 1994年02期 期刊

关键词: 大蒜 / 细胞 / 悬浮培养 / 超氧化物歧化酶

下载(255)| 被引(13)

人β地中海贫血β~(41/42)突变基因的克隆和真核表达体系的...  CNKI文献

目的:克隆人地中海贫血基因β41/42及调控系列LCR,构建该致病基因的体外真核表达体系,为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法:抽提β41/42纯合子患者的DNA,PCR扩增出人β珠蛋白基因座控制区(LCR)和β41/42基因,将其...

唐晖 李弘剑... 《暨南大学学报(医学版)》 2008年02期 期刊

关键词: 地中海贫血 / β41/42突变基因 / 基因疗法 / 急性白血病

下载(165)| 被引(5)

根癌农杆菌介导β-1,4-半乳糖苷转移酶基因转化大豆及其转基...  CNKI文献

以大豆下胚轴为外植体 ,通过根癌农杆菌介导转化法 ,建立起良好的转化系统 ,将人的 β -1 ,4-半乳糖苷转移酶基因 (hGT)导入大豆。经转化的外植体在添加 1 0 0mg/L氨苄青霉素和 5 0mg/L卡那霉素的选择培养基中可诱导出...

张毅 李弘剑... 《药物生物技术》 2001年03期 期刊

关键词: β-1 / 4-半乳糖苷转移酶基因 / 大豆下胚轴 / 根癌农杆菌介导法

下载(101)| 被引(19)

重组人巨细胞病毒的转染、培养及其表型鉴定  CNKI文献

[目的]对重组人巨细胞病毒进行体外包装培养并鉴定,为该病毒基因组功能研究提供稳定的实验材料。[方法]用试剂盒抽提、纯化重组人巨细胞病毒Towne基因组(Towne-BAC),构建pcDNA3.1(+)-UL82表达质粒;将Towne-BAC与pcDNA...

朱峰 李弘剑... 《现代预防医学》 2010年12期 期刊

关键词: 基因表达 / HCMV / PCR / UL138

下载(187)| 被引(1)

工程菌BL21-PET21a(+)-phy A表达植酸酶的研究  CNKI文献

对来源于Aspergillusniger的植酸酶基因phyA进行了改造 ,去除了内含子和信号肽编码序列后重组到表达载体PET2 1a( + )上 ,导入大肠杆菌BL2 1 (DE3)中 ,构建工程菌株BL2 1 PET2 1a( + ) phyA。植酸酶基因在工程菌株中...

魏威 李弘剑... 《中国生物工程杂志》 2004年01期 期刊

关键词: 植酸酶 / 高效表达 / 包涵体 / 复性

下载(159)| 被引(4)

核酶M1GS-T6对HCMV UL97基因RNA片段体外切割作用  CNKI文献

目的:研究M1GS核酶对HCMV UL97 mRNA的体外切割作用。方法:针对HCMV UL97 mRNA T6位点设计与之互补的引导序列(Guide Sequence,GS),将其共价结合至大肠杆菌核酶P催化亚基(M1 RNA)的3′末端,构建M1GS-T6核酶,并用其对U...

张欣 李弘剑... 《暨南大学学报(医学版)》 2007年04期 期刊

关键词: 人巨细胞病毒(HCMV) / UL97 / 核酶P / M1GS-T6

下载(105)| 被引(3)

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