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重组肠激酶酶切Trx-rPA融合蛋白的研究  CNKI文献

重组肠激酶(rEK)酶切重组硫氧还蛋白瑞特普酶融合蛋白(Trx-rPA),环境pH较高,rEK的酶切活性也较强,但融合蛋白裂解后产生的瑞特普酶(rPA)易转化成降解rPA。Lys对rEK酶切Trx-rPA的活性及对rPA向降解rPA的转化均无抑制作...

易进华 王罗春... 《中国医药工业杂志》 2007年06期 期刊

关键词: 融合蛋白 / 瑞特普酶 / 肠激酶

下载(372)| 被引(7)

大肠杆菌表达Trx-rPA融合蛋白的复性纯化  CNKI文献

大肠杆菌高密度发酵以包涵体形式表达融合蛋白Trx-rPA,表达量22%。包涵体蛋白洗涤后经金属螯合层析纯化,纯度达80%以上。经胱氨酸衍生,以脉冲加样形式复性,复性率可高达30%。经ETI-Sepharose纯化,复性的融合蛋白生物活...

易进华 谭靖伟... 《微生物学通报》 2007年02期 期刊

关键词: 瑞特普酶 / 复性 / 包涵体 / 融合蛋白

下载(260)| 被引(3)

融合牛肠激酶轻链EK_L包涵体蛋白的复性纯化  CNKI文献

大肠杆菌高密度发酵表达肠激酶轻链融合蛋白DsbA-rEKL,主要以包涵体形式存在。包涵体经4mol/L尿素和0.5%TritonX-100洗涤,以6mol/L盐酸胍、100mmol/LDTT溶解,在胱氨酸存在下,以脉冲加样方式复性。融合蛋白复性在6mmol...

易进华 张元兴 《生物工程学报》 2006年05期 期刊

关键词: 融合蛋白 / 肠激酶 / 复性 / 包涵体

下载(331)| 被引(1)

重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的复性纯化  CNKI文献

刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,可抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶及组织纤溶酶原激活剂(t-PA)等。本研究利用大肠杆菌高密度发酵表达ETI,产物以包涵体形式存在,经体外以脉冲稀释的方式复性并纯化后,每...

易进华 吴劲松... 《中国医药工业杂志》 2007年05期 期刊

关键词: 刺桐胰蛋白酶抑制剂 / 复性 / 组织纤溶酶原激活剂 / 瑞特普酶

下载(103)| 被引(1)

人组织性纤溶酶原激活物衍生物在大肠杆菌硫氧化还原蛋白融...  CNKI文献

目的 :克隆含tPA中 355个氨基酸密码子 ( 1- 3和 176- 52 7氨基酸 )的cDNA序列(tPA355) ,将其在大肠杆菌融合蛋白表达系统中表达 ,并在体外复性使其具有激活纤溶酶原的生物活性。方法 :采用RT -PCR技术从人黑色素瘤细...

苏勇 易进华... 《生物工程进展》 2000年06期 期刊

关键词: 组织型纤溶酶原激活物 / 硫氧化还原蛋白 / 大肠杆菌

下载(84)| 被引(11)

PCR引物浓度对寡核苷酸液相杂交的影响  CNKI文献

目的考察PCR引物浓度配比对液相微珠杂交效率的影响,寻求具有较强杂交信号和较好稳定性的PCR引物浓度配比。方法建立HLA-DRB1等位基因的相关数据库,选择在HLA-DRB1位点的第二外显子上设计探针,并且选择其保守序列作为...

李义良 易进华... 《中国医药生物技术》 2010年02期 期刊

关键词: 聚合酶链反应 / 寡核苷酸序列分析 / 核酸杂交

下载(153)| 被引(3)

重组大肠杆菌高密度培养的进展  CNKI文献

重组大肠杆菌高密度培养是增加重组蛋白产率的最有效方法。选择最佳的表达系统以及培养基和培养方式是获得高密度和高表达的重组大肠杆菌的有效途径。在培养过程中 ,通过控制副产物、pH、温度和诱导时机以及补料方式等...

沈毅珺 姚见儿... 《药物生物技术》 2000年04期 期刊

关键词: 重组大肠杆菌 / 高密度培养 / 分批补料培养 / 比生长速率

下载(522)| 被引(42)

环介导的等温扩增技术对HBV、HCV和HIV核酸检测的研究  CNKI文献

目的建立环介导的等温扩增技术(LAMP)对HBV、HCV和H IV核酸检测的方法并对检测灵敏度和特异性作初步考核。方法通过引物设计和筛选、内质控的设计与时间分辨浊度检测方法的运用,建立LAMP HBVDNA、HCV RNA和H IV RNA扩...

王迅 贾尧... 《中国输血杂志》 2008年11期 期刊

关键词: 环介导的等温扩增 / 核酸检测 / 乙型肝炎病毒 / 丙型肝炎病毒

下载(345)| 被引(4)

新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L的构建  CNKI文献

目的 :将柔性多肽接头和多克隆位点引入噬菌粒载体 pCANTAB5X中 ,构建适用于展示各种随机肽库、功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量 (>30 0个氨基酸 )功能蛋白的新型噬菌粒展示载体。 方法 :应用 5′端含Xb...

沈毅珺 潘卫... 《第二军医大学学报》 2003年03期 期刊

关键词: 噬菌体展示 / 噬菌粒载体 / 多克隆位点 / 多肽接头

下载(183)| 被引(14)

基因重组人淋巴毒素抗肿瘤作用  CNKI文献

目的:研究基因重组人淋巴毒素(rhLT,以下简称LT)体内抗肿瘤作用。方法:LT体内对小鼠肉瘤S_(180),小鼠肝癌HAC,小鼠结肠癌Colon26,人体膀胱癌T_(24)及小鼠黑色素瘤肺转移的抑制作用,LT合并CTX,MTX,MMC对小鼠肉瘤S_(180...

沈龙海 卢艳萍... 中国制药工业药理学会20周年学术会议论文集 2002-06-30 中国会议

关键词: 基因重组人淋巴毒素 / 抗肿瘤作用 / 移植性肿瘤 / 增效作用

下载(16)| 被引(1)

基因重组人淋巴毒素对小鼠免疫促进作用的研究  CNKI文献

目的:基因重组人淋巴毒素(rhLT,以下简称LT)对机体免疫功能的作用。方法:采用同位素掺入法研究LT对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖NK细胞活性及IL-2产生的影响;探讨其对机体免疫功能的影响。结果:LT对荷瘤肺癌小鼠在剂量25-1...

卢艳萍 沈龙海... 中国制药工业药理学会20周年学术会议论文集 2002-06-30 中国会议

关键词: 基因重组人淋巴细胞(rhLT / LT) / 免疫促进 / 脾淋巴细胞增殖

下载(18)| 被引(1)

重组人组织型纤溶酶原激活物衍生物在大肠杆菌中表达的研究  CNKI文献

重组人组织型纤溶酶原激活物衍生物(K2P)体内半衰期长优于天然tPA。在原核系统中直接表达K2P的表达量很低,仅5%左右,构建Trx-K2P融合蛋白后可将表达量提高至10%。为了进一步提高产量,使用诱...

沈毅珺 李军... 《药物生物技术》 2001年06期 期刊

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