重组Thermobifida fusca角质酶的高效胞外表达及其分子机制 CNKI文献
角质酶是一种多功能酶，能够催化各类聚酯、不溶性的甘油三酯和小分子可溶性酯类物质的水解反应，多种酸和醇的酯化反应以及酯和醇的酯交换反应，在纺织、洗涤剂、酯合成以及环保等诸多领域具有广泛的应用前景。然而，...
重组嗜热栖热菌海藻糖合酶制备海藻糖的工艺条件优化 CNKI文献
海藻糖具有独特的生物活性,在多种行业应用广泛。海藻糖合酶能够专一性催化麦芽糖一步生成海藻糖。本文通过PCR扩增获得了来源于Thermus thermophilus ATCC33923的海藻糖合酶基因Tre S,构建了基因工程菌E.coli BL21(D...
随着生物技术的不断发展,大肠杆菌胞外分泌分子机理日渐明晰,大肠杆菌表达系统成为实现规模化制备胞外重组蛋白的途径之一。本文综述了大肠杆菌α-溶血素分泌途径的转运机制及应用前景。
对前期获得的Thermus thermophilus海藻糖合酶进行了分子改造以提升其催化制备海藻糖的性能。利用定点突变技术,将第251位Pro突变为Leu,得到突变体P251L,并于E.coli BL21(DE3)中重组表达,重组菌在摇瓶中发酵酶活为6.9...
基于实践创新型人才培养的《蛋白质工程》课程教学改革探索... CNKI文献
蛋白质工程是一个新兴学科,与人类生产和生活息息相关。作为生物工程专业教学的一门重要课程,蛋白质工程的教学对于培养实践创新型人才具有重要作用。本文从教材建设、教学模式和方法、考核体系等几方面对该课程教学改...
为了实现来源于嗜热栖热菌的海藻糖合酶的高效表达,对E.coli BL21(DE3)/p ET24a(+)-Tre S基因工程菌在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化,获得的最优发酵条件为:诱导温度32℃,当OD600达到50时以0.2 g/(L·h)的速率补加...
重组Athrobacter ramosus S34MTSase和MTHase的酶学性质及其... CNKI文献
以淀粉为底物,通过麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltosyltrehalose synthase,MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltosyltrehalose hydrolase,MTHase)的共同作用生产海藻糖是一种经济高效的方法。对Arthrobacter ramosus ...
王魁 宿玲恰... 《食品与发酵工业》 2017年07期 期刊
关键词： 海藻糖 / 麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltosyltrehalose / synthase / MTSase)
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Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909麦芽寡糖基海藻糖合... CNKI文献
为实现Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909来源的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(MTSase)基因tre Y在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中的重组表达,以质粒p ET-24a(+)-tre Y为模板PCR扩增得到目的基因,并与表达载体pHY30...
韩唱 宿玲恰... 《生物技术通报》 2017年07期 期刊
关键词： 麦芽寡糖基海藻糖合成酶 / 枯草芽孢杆菌 / 重组表达 / 发酵优化
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D-阿洛酮糖3-差向异构酶在枯草芽孢杆菌中的高效表达及固定... CNKI文献
将来源于Clostridium cellulolyticum H10的DPEase基因在食品级表达系统Bacillus subtilis中进行产酶研究,在3L发酵罐中高密度发酵最终酶活可达495U/ml,得到高表达量的DPEase酶液。通过硅藻土-海藻酸钠(吸附包埋法)对...
孙帆 宿玲恰... 《中国生物工程杂志》 2018年07期 期刊
关键词： D-阿洛酮糖3-差向异构酶 / 枯草芽孢杆菌 / 高密度发酵 / 固定化细胞
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重组谷氨酸脱羧酶制备γ-氨基丁酸的工艺条件优化 CNKI文献
谷氨酸脱羧酶,一种磷酸吡哆醛(PLP)依赖性酶,能专一、不可逆地催化L-谷氨酸脱羧得到γ-氨基丁酸(GABA)。构建了产Lactobacillus brevis WJH3谷氨酸脱羧酶重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/p ET-24a-gad,以此作为菌种进行...
共表达磷脂酶C促进葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的胞外表达 CNKI文献
磷脂酶C(PLC)能够水解细胞膜主要成分磷脂,使细胞膜通透性增强,从而能够释放出胞内物质。作者构建了PLC与天然胞内定位蛋白葡萄糖异构酶(GI)共表达的重组大肠杆菌,摇瓶发酵胞外上清液中GIC酶活达到3.4 U/m L,占胞外和...
重组精氨酸脱亚胺酶制备L-瓜氨酸的工艺条件优化 CNKI文献
将来源于Pseudomonas putida ACCC 10185的ADI编码基因克隆到表达载体p ET-24a(+)中,转化Escherichia coli BL21(DE3),通过超声波破碎得到粗酶液,酶活检测ADI酶活为26 U/m L发酵液。对酶转化L-精氨酸盐酸盐生成L-瓜氨...
环糊精葡萄糖基转移酶的酿酒酵母表面展示及其生产2-O-α-D... CNKI文献
【目的】将环状芽孢杆菌251(Bacillus circulans 251)来源的环糊精葡萄糖基转移酶(Cyclodextrin Glycosyltransferase,CGTase)展示在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞表面,构建全细胞催化剂生产2-O-α-D-吡喃葡...
熊艳军 宿玲恰... 《微生物学报》 2015年10期 期刊
关键词： 环糊精葡萄糖基转移酶 / 酿酒酵母 / 表面展示 / 2-O-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸
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提高源自Bacillus circulans 251的β-CGTase对麦芽糖亲和性... CNKI文献
将B. circulans 251β-CGTase应用于海藻糖制备,海藻糖转化率从50. 4%提高至71. 9%。为进一步提高底物的转化率,运用易错PCR-高通量筛选技术筛选对以麦芽糖为歧化反应受体的亲和性提高的B. circulans 251β-CGTase突变...
重组4-α-糖基转移酶转化淀粉制备大元环糊精的条件优化 CNKI文献
4-α-糖基转移酶能够以淀粉为底物通过分子内转糖基作用制备大元环糊精。本研究成功构建了产超嗜热菌Aquifex aeolicus来源的4-α-糖基转移酶重组菌的E.coli BL21 (DE3)/pET-24a(+)-AaAM。对重组菌进行摇瓶发酵,培养2...
重组大肠杆菌产Streptomyces sp.FA1来源木聚糖酶的摇瓶发酵... CNKI文献
为了实现来源于Streptomyces sp.FA1的木聚糖酶的高效胞外分泌表达,对E.coli BL21(DE3)/pET20b(+)/coe/xynA基因工程菌的发酵产酶诱导条件进行优化,获得最优的诱导条件为25℃发酵6 h后添加终浓度为0.4 mmol/L的IPTG。...
重组Bacillus subtilis产麦芽四糖淀粉酶的发酵优化及麦芽四... CNKI文献
麦芽四糖淀粉酶可水解淀粉或麦芽糊精生成麦芽四糖,在食品领域有着广泛应用。为降低生产成本,对前期构建的生产麦芽四糖淀粉酶的重组枯草芽孢杆菌进行发酵优化。通过对培养基的氮源和碳源进行优化,以5%的接种量,在33℃...
环糊精葡萄糖基转移酶生产α-熊果苷的反应条件优化及分子改... CNKI文献
选择4种环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)分别为来源于Paenibacillus macerans的α-CGTase,Bacillus circulans 251的β-CGTase,Bacillus stearothermophilus NO_2和Anaerobranca gottschalkii的α/β-CGTase,研究不同种...
张文蕾 宿玲恰... 《食品与发酵工业》 2017年06期 期刊
关键词： 环糊精葡萄糖基转移酶 / α-熊果苷 / 酶催化 / 定点突变
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为了实现镰孢菌角质酶的高效表达,对重组菌株P. pastoris KM71/pPIC9K-ScCuA在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化,获得的最优发酵条件为:诱导温度28℃,初始诱导菌浓OD600为100,诱导阶段甲醇体积分数为1%条件下进行诱导产酶...
以大米淀粉为原料,多酶复配制备海藻糖。确定了实验室条件下多酶复配生产海藻糖的最佳条件:以15%(m/V)大米淀粉为底物,催化温度45℃、pH 6. 0、DE值16、α/β-CGTase加量为1. 4U/ml、催化28h后糖化处理12h,海藻糖转化...
